Page 144 - Giáo trình môn học thực hành vi sinh
P. 144
nhưng luôn ở thế cân bằng để duy trì một trạng thái tiêu hóa và hấp thu bình thường.
Khi mất thế cân bằng này nghĩa là khi có loạn khuẩn sẽ gây ra ỉa chảy kéo dài.
Loạn khuẩn hay xảy ra sau khi dùng kháng sinh phổ rộng điều trị kéo dài. Loạn
khuẩn cũng có thể xảy ra sau bệnh lỵ hoặc các bệnh cấp tính khác và có ở những
người suy dinh dưỡng, nó là nguyên nhân gây viêm đại tràng mạn tính.
ở những bệnh nhân bị ỉa chảy do loạn khuẩn (phân lỏng, có nhiều nhày, màu
xanh, không có mùi thối, có thể có máu), nếu dùng kháng sinh để điều trị thì bệnh
càng nặng hơn. Vì vậy, ở các bệnh nhân bị ỉa chảy kéo dài, ngoài việc nuôi cấy phân
tìm vi khuẩn gây bệnh, cần phải làm xét nghiệm vi khuẩn chí để đánh giá tình trạng vi
khuẩn và có biện pháp điều trị thích hợp để lập lại sự cân bằng của vi khuẩn.
Vi khuẩn ở ruột có nhiều loại ưa khí và kị khí với số lượng rất lớn. Trong 1 gam
11
phân có khoảng 10 vi khuẩn, chiếm một phần lớn trọng lượng của phân.
Để đánh giá vi khuẩn chí, cần làm xét nghiệm nhuộm soi và nuôi cấy để tính tỷ
lệ trực khuẩn E. coli so với các vi khuẩn ưa khí khác và đếm số lượng E. coli trong 1
gam phân.
2. Lấy bệnh phẩm
Số lượng phân lấy xét nghiệm ít nhất là 1 gam vào lọ vô khuẩn và gửi ngay đến
o
phòng xét nghiệm. Nếu chưa nuôi cấy được phải bảo quản phân ở tủ lạnh 2-4 C.
3. Nhuộm soi trực tiếp
Làm tiêu bản phân nhuộm gram soi kết quả. ở phân bình thường chủ yếu là trực
khuẩn gram âm. Trong trường hợp loạn khuẩn trực khuẩn gram âm giảm rất nhiều.
Các cầu khuẩn và trực khuẩn gram xuất hiện nhiều, có thể có nấm men.
4. Nuôi cấy phân
Dùng que cấy lấy 1 quai phân ria cấy đều lên đĩa thạch máu, chú ý cấy để khuẩn
o
lạc mọc thưa có thể đếm được. Để tủ ấm 37 C, sau 24 giờ đếm các khuẩn lạc ở đĩa
thạch máu, xác định các loại vi khuẩn đã mọc và tỷ lệ phần trăm E. coli.
Pha loãng 1 gam phân vào 9 ml nước muối sinh lý vô khuẩn. Ngoáy đều, pha
-5
loãng tiếp để có độ pha loãng cuối cùng là 10 . Sau đó lấy 1 giọt (1 ml = 20 giọt) nhỏ
vào đĩa môi trường thạch thường rồi ria cấy đều trên khắp mặt thạch. Để tủ ấm
o
37 C/24 giờ. Đếm số lượng các loại vi khuẩn trên đĩa thạch thường, xác định các loại
vi khuẩn và trực khuẩn E. coli trong 1 gam phân theo công thức:
144