Page 51 - Giáo trình môn học thực hành vi sinh
P. 51
cho vào chất thử là -naphthylamine và acid sulfanilic với sự tạo thành màu đỏ diazo
(p-sulfobenzeneazo- -naphthylamine).
4. Khả năng sử dụng citrate
Natri citrate là một muối của acid citric, một hợp chất hữu cơ. Để phát hiện khả
năng sử dụng citrate của vi khuẩn, người ta nuôi cấy vi khuẩn vào trong môi trường
simmons có natri citrate, đây là phân tử có chứa một anion, cũng là một nguồn carbon
duy nhất và trong môi trường còn có (NH )H PO chứa một nguồn nitro duy nhất.
4
2
4
Nếu vi khuẩn có khả năng sử dụng citrate từ natri citrate thì sẽ kéo theo sự khử được
nitro từ muối amoni với sản phẩm tạo thành aminonium hydroxide (NH OH) làm
4
kiềm hóa môi trường, do đó sẽ làm cho chất chỉ thị xanh bromthymol trong môi
trường (thường là môi trường simmons) chuyển sang màu xanh nước biển.
5. Urease
Urease là một enzyme có một số loài vi khuẩn, nó có khả năng thủy phân ure
(NH -CO-NH ) theo phản ứng:
2
2
H N-CO-NH + 2HOH Urease NH + CO + H O
2
2
2
3
2
Để phát hiện khả năng này của vi khuẩn, người ta thường nuôi cấy chúng vào
môi trường có ure (thường là môi trường lỏng ure - indol hoặc môi trường
christensen). Nếu vi khuẩn có enzyme urease thì sẽ xuất hiện sản phẩm NH trong môi
3
trường, những NH này phản ứng với dung dịch tạo thành amonium carbonate
3
[(NH ) CO ] làm cho môi trường bị kiềm hóa. Do vậy làm màu đỏ phenol của môi
4 2
3
trường chuyển sang màu đỏ cánh sen.
6. Catalase
Đây là một enzyme thủy phân hydrogen peroxide (H O )
2
2
H O Catalase 2 2
H O + 1/2 O
2
2
Ngoại trừ streptococci, phần lớn vi khuẩn hiếu khí tùy tiện và kỵ khí có chứa
enzyme catalase. Thử nghiệm tìm enzyme này có thể thực hiện trên phiến kính hoặc
trong ống nghiệm bằng cách nhỏ một giọt oxy già (H O ) lên phiến kính hoặc ống
2
2
nghiệm. Nếu vi khuẩn có catalase thì thử nghiệm dương tính với hiện tượng nổi các
bọt khí khi ta nghiền một khuẩn lạc vi khuẩn nào đó. Nếu âm tính thì không có hiện
tượng gì xảy ra.
51
