Page 52 - Giáo trình môn học thực hành vi sinh
P. 52
7. Khả năng sinh indol
Một số vi khuẩn có chứa enzyme trytophanase, enzym này có khả năng phân hủy
tryptophan tạo ra các sản phẩm là indol, acid pyruvic và hợp chất amoni. Để xác định
khả năng này người ta nuôi cấy vi khuẩn vào môi trường có tryptophan (thường là môi
trường ure - indol), nếu vi khuẩn có enzyme tryptophanase thì trong môi trường sẽ
xuất hiện indol và nó được phát hiện khi nhỏ thuốc thử kovac hoặc erhlich. Nếu phản
ứng dương tính, indol tan trong cồn isoamylic sẽ bắt màu đỏ thẫm nổi lên thành một
vòng tròn trên bề mặt môi trường).
8. Khả năng sinh H 2S
Một số loài vi khuẩn có khả năng giải phóng sulfua từ các acid amin hoặc hợp
chất khác chứa lưu huỳnh ở dạng H S. Để xác định tính chất này của vi khuẩn thì ta sẽ
2
nuôi cấy chúng vào môi trường phải thỏa mãn hai điều kiện:
- Có dẫn xuất của S (thường là acid amine cysteine hoặc methionin).
2+
2+
- Có chất phát hiện như: ion Fe (môi trường KIA), ion Pb (môi trường thạch
chì).
Nếu có H S sinh ra thì trong môi trường sẽ xuất hiện màu đen do sự tạo thành
2
các muối sulfua (FeS hoặc PbS).
9. Khả năng thủy phân hippurate
Liên cầu B có chứa enzyme hippuricase, nó có khả năng thủy phân acid hippuric.
Do vậy, người ta thường chẩn đoán liên cầu B bằng cách nuôi cấy vào môi trường có
natrihippurat (môi trường lỏng natrihippurat) khoảng 20-24h thì sẽ xảy ra:
Natrihippurat Hippuricas e
Natribenzoat + glycine
Vì vậy, nếu vi khuẩn có khả năng thủy phân hippurat (tức là có hippuricase) thì
sau nuôi cấy 20-24h trong môi trường sẽ xuất hiện natribenzoat và chất này được phát
hiện bằng cách nhỏ dư dung dịch FeCl có chứa một lượng nhỏ HCl thì thấy có kết
3
lắng xuống đáy (sắt III hippurat).
10. Thử nghiệm bile - esculine
Một số vi khuẩn (đặc biệt là liên cầu D) có khả năng phát triển trong môi trường
có muối mật và thủy phân được esculine (dạng hợp chất glycoside) thành glucose và
aglyconeasculetine. Để xác định khả năng này ta nuôi cấy vi khuẩn vào môi trường có
1-4% muối mật, bile - esculine và muối sắt (III) citrate. Nếu vi khuẩn có tính chất trên
52