Page 50 - Giáo trình môn học thực hành vi sinh
P. 50
bằng nước muối. Nếu vi khuẩn có gelatinase thì màu phim ảnh bị tan hết, còn nếu
không có gelatinase thì màu phim ảnh vẫn tồn tại.
2.2. Khả năng khử carboxyl (decarboxylase)
Một số loài vi khuẩn có khả năng sản xuất enzyme decarboxylase với tác dụng
khử các aminoacid thành amine và CO :
2
Aminoacid
Amine + CO
Decarboxyl ase 2
Lysin, ornithin và arginin là 3 aminoacid thường xuyên dùng để xác định khả
năng này của vi khuẩn (thường là vi khuẩn đường ruột). Môi trường Moeller
decarboxylase là môi trường cơ bản có cho thêm các aminoacid cần xác định khả năng
khử carboxyl của vi khuẩn. Để tìm khả năng này của vi khuẩn, người ta nuôi cấy vào
2 ống môi trường khác nhau, một ống gồm môi trường cơ bản có chứa các acidamin
cần thiết, còn một ống chỉ có môi trường cơ bản. Trong suốt thời kỳ nuôi cấy cả hai
ống sẽ làm chất chỉ thị tím bromcresol sang màu vàng do vi khuẩn đã lên men một
phần nhỏ glucose trong môi trường, nếu như aminoacid bị khử carboxyl thành amin
thì môi trường bị kiềm hóa trở lại và quay về màu tím ban đầu.
2.3. Khả năng khử amine (phenylalanin deaminase)
Phenylalanine là một aminoacid, khi bị khử amine thì nó ở dạng keto-acid
(phenylpyruvic). Thử nghiệm phenylalanine dựa trên việc phát hiện acid
phenylpyruvic trong môi trường (thạch phenylalanin). Sau khi nuôi cấy vi khuẩn 18-
24 h bằng cách nhỏ vài (IV-V) giọt dung dịch FeCl (ferric chlonde) 10% vào thì có
3
kết quả. Nếu trong môi trường có acid phenylpyruvic (thử nghiệm dương tính) thì thấy
xuất hiện màu xanh của sắt (III) phenylpyruvat.
3. Khử nitrate thành nitrit
Tìm khả năng khử nitrate thành nitrit của vi khuẩn rất quan trọng trong việc xác
định và phân biệt các nhóm vi sinh vật. Tất cả các vi khuẩn đường ruột (ngoại trừ
Enterobacter agglomerans và Erwinia) đều có khả năng khử nitrate thành nitrit như
sau:
-
NO - 2e + 2H NO + H O
2
3
2
Để phát hiện khả năng của vi khuẩn, người ta nuôi cấy vi khuẩn vào môi trường
-
có NO (KNO ), sự xuất hiện của nitrit trong môi trường nuôi cấy được phát hiện bởi
3
3
50