Page 80 - Kiểm nghiệm thuốc

Tất cả chất thải rắn, môi trường chứa hoặc nhiễm vi sinh vật cần được hấp

khử trùng trước khi thải đi.

Các dụng cụ, bình chứa nhiễm vi sinh vật cần được ngâm vào dung dịch chất

diệt khuẩn (nước Javel) trước khi rửa và tái sử dụng.
4.2. Kỹ thuật cơ bản trong kiểm nghiệm vi sinh vật

4.2.1. Phương pháp pha chế môi trường

- Môi trường nuôi cấy vi sinh vật thông thường chứa đầy đủ các thành phần về

nguồn carbon, đạm, chất khoáng, các yếu tố sinh trưởng, … ngoài ra còn chứa một

lượng nước cần thiết (khoảng 70-85%), có pH xác định thích hợp cho sự phát triển
của vi sinh vật. Trong một số môi trường đặc biệt có thể thêm các chất kháng sinh,

các chất ức chế sự sinh trưởng của một số vi sinh vật theo yêu cầu mục tiêu của thí

nghiệm, …

- Môi trường nuôi cấy thường được phân loại dựa vào tính chất vật lý môi

trường và chia thành ở 3 dạng: lỏng (liquid media), rắn (solid media) và bán rắn
(semisolid media). Môi trường nuôi cấy yêu cầu phải vô khuẩn.

+ Với môi trường lỏng: cân các thành phần, hoà tan trong nước.

+ Với môi trường rắn: bổ sung thêm chất làm rắn như thạch, đồng thời phải

gia nhiệt để làm tan môi trường.

- Yêu cầu môi trường phải trong để dễ quan sát, trường hợp cần thiết phải lọc
qua giấy lọc, gạc hoặc than hoạt. Tuỳ theo đối tượng yêu cầu của thử nghiệm, môi

trường được điều chỉnh đến pH qui định bằng dung dịch HCl 1 M hoặc dung dịch

NaOH 1 M. Môi trường được khử trùng ở nhiệt độ và thời gian phụ thuộc vào thành

phần của môi trường. Với các môi trường bình thường, điều kiện khử trùng ở 121 C
o
(1 atm) trong 15 - 20 phút.
- Môi trường đông khô: được pha chế đơn giản bằng cách phối hợp một lượng

cần thiết môi trường đông khô vào nước, điều chỉnh pH, đóng ống và khử trùng.

Trong nhiều trường hợp việc điều chỉnh pH là không cần thiết.

- Các ống nghiệm đựng môi trường phải sạch và không có bụi, có thể sử dụng

để đựng môi trường mà không cần phải rửa.
- Khi phân chia môi trường ra dụng cụ chứa cần chú ý chỉ dùng 1 phần của

76