Page 41 - Dược liệu

- Các thuốc thử lên phần aglycon.
Thuốc thử lên nhân steroid:
+ Thuốc thử Libermann–Burchardt (Bocsa): phản ứng không những lên màu với
glycosid tim mà còn lên màu với dẫn chất có nhân steroid.
Theo Stoll: glycosid tim + vài giọt acid acetic + vài giọt hỗn hợp (50 phần
anhydric acetic + 1 phần acid sulfuric): màu hồng đến xanh lá.
Theo BriesKorn : glycosid tim + CHCl3 + 2ml hỗn hợp (1ml H2SO4 đậm đặc +
20ml anhydric acetic trộn đều ), màu thay đổi từ màu đỏ - hồng - xanh lá - xanh
tràm.
+ Thuốc thử acid photphoric: có huỳnh quang xanh lục mạnh ở ánh sáng tử
ngoại.
+ Thuốc thử Tattje: acid photphoric 85% 62,5g, H 2SO 4 37,5g và FeCl 3.6H 2O
0,05g cho màu đỏ đậm.
Thuốc thử lên vòng lacton.
+ Thuốc thử Beljet: acid picric 1% trong môi trường kiềm, phản ứng có màu đỏ
da cam bền (dùng thuốc thử mới pha).
+ Thuốc thử Kedde là dung dịch: 3,5-dinitrobenzoic acid 2% trong etanol, trong
môi trường kiềm có màu đỏ tía.
+ Thuốc thử Raymond- Marthoud (m. dinitrobenzen 1% trong cồn tuyệt đối) ở
môi trường kiềm phản ứng cho màu tím (không bền).
- Sắc ký lớp mỏng
Để xác định đối chiếu hoặc tách từng chất để nghiên cứu ta có thể thực hiện sắc
ký lớp mỏng
Chất hấp phụ Silicagel G.
Một số hệ dung môi:
+ Etytacetat- metanol-nước [80:5:5]
+ Cloroform- pyridin [60:10]
+ Cloroform- methanol [92:8]
+ Butanol - acid acetic/nước [100:4:24]
+ Ethyl acetat-pyridin-nước [5:1:4],
Hiện màu: dẫn chất nhóm cardenolid :
+ Thuốc thử Kedde. (màu đỏ)
+ Thuốc thử Raymomd (màu tím)
Dẫn chất đường khử 2-desoxy : Thuốc thử Xanthydrol
- Quang phổ:
Tử ngoại.
+ Cardenolid. Có đỉnh hấp thụ cực đại 215 – 218nm.
+ Bufadinolid có đỉnh hấp thụ cực đại 300nm.
Hồng ngoại: Bufadinolid 3 đỉnh: 1730 cm -1 1640 cm-1 1540 cm –
- Định lượng:
Chủ yếu nhóm Cardenolid dựa vào phản ứng màu huỳnh quang.
+ Định lượng trực tiếp trên dịnh chiết toàn phần (đã loại tạp).
+ Định lượng: tách Cardenolid bằng sắc ký lớp mỏng.
Đo mật độ quang .
Dùng phổ hùynh quang có độ nhạy cao .
+ Định lượng genin sau khi thuỷ phân bằng HCl 0,2N
+ Chiết bằng ether hoặc cloroform.
- Đánh giá bằng phương pháp sinh vật.