Page 296 - Hóa phân tích

Nếu không có bản mỏng tráng sẵn, có thể tự chuẩn bị bản mỏng với dụng cụ

đơn giản và hóa chất phù hợp.

+ Pha động:

Pha động cho SKLM rất thay đổi tùy thuộc vào cơ chế sắc ký. Để tăng cường

sức rửa giải, thường kết hợp 2 dung môi. Nguyên lý chia tách dựa vào hệ số phân

bố giữa hai pha. Tuy nhiên lựa chọn tối ưu hóa sắc ký thường dựa chủ yếu vào kinh

nghiệm. Sau đây là gợi ý chung nhất cho pha động:

- Dung môi cần có độ tinh khiết cao.

- Cần điều chỉnh sức rửa giải của pha động để trị số R f nằm trong khoảng 0,2

- 0,8 đạt độ phân giải cực trị.

- Chất phân tích dạng ion hay phân cực được rửa giải tốt bằng dung môi

phân cực như hỗn hợp n- butanol – nước. Thêm một ít acid acetic hoặc amoniac

vào nước sẽ làm tăng độ tan của base hoặc acid tương ứng.

- Khi dùng silicagel hoặc các chất hấp phụ phân cực khác, độ phân cực của

pha động sẽ quyết định tốc độ di chuyển của chất phân tích và trị số R f của chúng.

Nếu thêm một ít dung môi ít phân cực như methylbenzen sẽ làm tăng đáng kể trị số

R f.

- Sức rửa giải của dung môi trong sắc ký lỏng hấp phụ hoàn toàn có thể sử

dụng cho SKLM với pha tĩnh là silica hoặc alumina.
+ Kỹ thuật SKLM:

Bản sắc ký thường có kích thước khác nhau. Hai loại thông dụng là 5 x 20
cm và 20 x 20 cm. Sau khi chọn bản mỏng phù hợp, thực hành SKLM gồm có 4

bước sau:
- Đưa mẫu phân tích lên bản mỏng

- Khai triển sắc ký với pha động phù hơp

- Phát hiện các vết trên sắc ký đồ

- Thu nhận và xử lý số liệu thực nghiệm

 Đưa chất phân tích lên bản mỏng:
286