Page 130 - Giáo trình môn học vi sinh vật học

2.3.1.2. Phương pháp MDHQ gián tiếp

Nguyên lý: KT được phát hiện nhờ KN mẫu và kháng KT (KKT) mẫu gắn huỳnh

quang. Các bước tiến hành như sau (Hình 39):

KKT-HQ

KT

KN Soi KHV HQ

(1) (2) (3) (4)

Hình 39. Phƣơng pháp MDHQ gián tiếp

2.3.2. Phản ứng miễn dịch phóng xạ (RIA-Radioimmunoassay)

Nguyên lý: Phức hợp KN-KT được phát hiện nhờ KT hoặc KN gắn chất đồng vị

phát xạ. Có thể phát hiện nơi phát xạ (nơi xảy ra phản ứng kết hợp KN-KT) hoặc đo
cường độ phát xạ (mức độ hình thành phức hợp KN-KT).

2.3.3. Phản ứng miễn dịch enzym ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)

Nguyên lý: Phức hợp KN-KT được phát hiện nhờ enzym gắn với KT hoặc KKT

tác động lên cơ chất đặc hiệu.

Có nhiều kỹ thuật ELISA. Sau đây chỉ giới thiệu 2 kỹ thuật, một để phát hiện KT
và một để phát hiện KN:

2.3.3.1. Kỹ thuật dùng KKT gắn enzym để phát hiện KT

Phản ứng này sử dụng KN mẫu và KKT mẫu gắn enzym. Các bước tiến hành

(Hình 40):

Cơ chất
Enzym

KT KKT
KN Kết quả

(1) (2) (3) (4) (5)

Hình 40. ELISA: Kỹ thuật dùng KKT gắn enzym để phát hiện KT

130