Page 131 - Giáo trình môn học vi sinh vật học
P. 131
2.3.3.2. Kỹ thuật dùng KKT gắn enzym để phát hiện KN
Phản ứng này sử dụng KT mẫu và KKT mẫu gắn enzym. Các bước tiến hành
(Hình 41): Cơ chất
KKT-E
KT
KT KN Đọc
kết quả
(1) (2) (3) (4) (5) (6)
Hình 41. ELISA: Kỹ thuật dùng KKT gắn enzym để phát hiện KN
2.3.4. Sắc ký miễn dịch
Nguyên tắc kỹ thuật có thể tóm tắt như sau:
KN vi sinh vật
KT
KKT gắn màu
(1) (2) (3)
Hình 42. Sơ đồ minh hoạ nguyên lý của kỹ thuật sắc ký miễn dịch
1. Bản sắc ký với KN được cố định và KKT gắn màu phân bố đều; 2. KT trong HT kết hợp với
KKT gắn màu và di chuyển; 3. Phức hợp KT-KKT gắn màu kết hợp với KN tạo vạch màu
Phức hợp kháng KT (KKT) gắn chất màu được phân bố đều trên bản sắc ký. KN
đặc thù của vi sinh vật được gắn cố định tại “vạch phản ứng”. Khi nhỏ HT cần xác định
KT lên bản sắc ký, KT đặc hiệu (nếu có) trong HT sẽ kết hợp với KKT gắn màu, phức
hợp KT-KKT gắn màu này di chuyển trên giấy sắc ký sẽ bị giữ lại tại “vạch phản ứng”
do KT kết hợp với KN vi sinh vật, kết quả “vạch phản ứng” hiện màu. Nếu trong HT
không có KT đặc hiệu, ở “vạch phản ứng” KN không thể giữ được KKT gắn màu, vì vậy
không hiện màu (Hình 47).
131