Page 131 - Giáo trình môn học vi sinh vật học
P. 131

2.3.3.2. Kỹ thuật dùng KKT gắn enzym để phát hiện KN

                       Phản  ứng  này  sử  dụng  KT  mẫu  và  KKT  mẫu  gắn  enzym.  Các  bước  tiến  hành


               (Hình 41):                                                            Cơ chất

                                                               KKT-E
                                                  KT
                    KT     KN                                      Đọc
                                                                                              kết quả

                    (1)                  (2)                  (3)                (4)                    (5)              (6)



                         Hình 41. ELISA: Kỹ thuật dùng KKT gắn enzym để phát hiện KN


               2.3.4. Sắc ký miễn dịch

                       Nguyên tắc kỹ thuật có thể tóm tắt như sau:




                                                                                       KN vi sinh vật

                                                                                               KT

                                                                                         KKT gắn màu



                        (1)                  (2)                (3)
                            Hình 42. Sơ đồ minh hoạ nguyên lý của kỹ thuật sắc ký miễn dịch

                1. Bản sắc ký với KN được cố định và KKT gắn màu phân bố đều; 2. KT trong HT kết hợp với

                  KKT gắn màu và di chuyển; 3. Phức hợp KT-KKT gắn màu kết hợp với KN tạo vạch màu

                       Phức hợp kháng KT (KKT) gắn chất màu được phân bố đều trên bản sắc ký. KN

               đặc thù của vi sinh vật được gắn cố định tại “vạch phản ứng”. Khi nhỏ HT cần xác định
               KT lên bản sắc ký, KT đặc hiệu (nếu có) trong HT sẽ kết hợp với KKT gắn màu, phức

               hợp KT-KKT gắn màu này di chuyển trên giấy sắc ký sẽ bị giữ lại tại “vạch phản ứng”

               do KT kết hợp với KN vi sinh vật, kết quả “vạch phản ứng” hiện màu. Nếu trong HT

               không có KT đặc hiệu, ở “vạch phản ứng” KN không thể giữ được KKT gắn màu, vì vậy

               không hiện màu (Hình 47).

                                                            131
   126   127   128   129   130   131   132   133   134   135   136