Page 121 - Giáo trình môn học thực hành vi sinh

Dùng kính lúp xem kỹ: kích thước, màu sắc, bề mặt trung tâm khuẩn lạc, tan

máy hay không. Cấy chuyển khuẩn lạc nghi ngờ vào môi trường thích hợp.

3.3. Streptococcus pneumoniae

Khuẩn lạc dẹt hay hơi lồi, tan máu . Kích thước khuẩn lạc phụ thuộc vào môi
trường cũ hay mới, vi khuẩn có vỏ hay không có vỏ.

Thử nghiệm optochin: cấy vi khuẩn đã thuần lên một đĩa thạch máu. Đặt khoanh

giấy optochin 5 g đường kính 6mm, để trong tủ ấm qua đêm.

Đọc kết quả: nếu đường kính vòng vô khuẩn  14 mm là dương tính (vi khuẩn

được coi là S. pneumoniae).

3.4. Haemophilus influenzae

H. influenzae là vi khuẩn khuyết dưỡng, nó đòi hỏi bắt buộc 2 yếu tố haematin
(yếu tố X) là nicotinmamide adenin dinucleotide (yếu tố V, NAD). Hai yếu tố này có

trong thạch chocolate.

Trên thạch chocolate sau 24 giờ khuẩn lạc H. influenzae không màu, đường kính

1-2 mm, nuôi cấy thuần có mùi đặc biệt. Trên thạch máu H. influenzae không mọc

hoặc mọc rất yếu, khuẩn lạc rất nhỏ, riêng rẽ, có thể tan máu .

3.4.1. Thử nghiệm "Vệ tinh" (Satellitism) với tụ cầu
Lấy vi khuẩn nghi ngờ hòa vào 2 ml nước pepton hoặc đệm photphat, lắc đều,

cấy vào thạch máu đĩa theo đường dích dắc, để khô mặt thạch rồi cấy tụ cầu vàng

o
thành một đường thẳng góc với các đường trên. ủ 36 C/24 giờ.
Tụ cầu (cũng như phế cầu và Neissenriae) tổng hợp được yếu tố V, yếu tố này

khuếch tán ra môi trường xung quanh sẽ kích thích sự phát triển của H. influenzae:
những khuẩn lạc gần tụ cầu to hơn hẳn những khuẩn lạc ở xa.

3.4.2. Thử nghiệm X và V

Chuẩn bị vi khuẩn giống như trên. Dùng que cấy vi khuẩn vào đĩa thạch thường

thành những đường song song gần nhau. Đặt khoanh giấy X và khoanh giấy V lên các

đường đó cách nhau 2 cm.
o
ủ 36 C/24 giờ. Nếu vi khuẩn chi mọc ở vùng giữa thạch giữa 2 khoanh giấy thì coi
như là H. influenzae, nếu mọc cả ở giữa và phía ngoài khoanh giấy V thì ci là H.

influenzae.

3.5. Streptococcus pyogenes

121