Page 72 - Kiểm nghiệm thuốc

Khí - lỏng Khí Lỏng Cột Phân bố

Lỏng - Rắn Lỏng Rắn Cột Hấp phụ

Lỏng - Lỏng Lỏng Lỏng Cột Phân bố

Lỏng - nhựa trao đổi Lỏng Rắn Cột Trao đổi ion

Lớp mỏng Lỏng Rắn Lớp mỏng Hấp phụ

Giấy Lỏng Rắn Giấy sắc ký Phân bố
Rây (sắc ký Gel) Lỏng Gel (Lỏng) Cột Theo kích thước

phân tử

Quá trình sắc ký thông thường gồm 3 giai đoạn chính: Đưa mẫu thử lên

pha tĩnh, cho pha động chạy, phát hiện các chất và xử lý kết quả.

3.3.3. Phương pháp sắc ký lớp mỏng
3.3.3.1. Khái niệm

Sắc ký lớp mỏng (Thin Layer Chromatography: TLC) về bản chất là hệ sắc ký

lỏng - rắn, trong đó pha tĩnh rắn (là chất hấp phụ được chọn phù hợp theo yêu cầu

phân tích) được trải thành lớp mỏng đồng đều trên bản kính, nhựa hay kim loại. Sau

đó, đưa hỗn hợp chất cần tách lên pha tĩnh bằng cách chấm dung dịch mẫu nghiên
cứu lên bản mỏng (cách rìa bản mỏng 1 – 2 cm). Pha động là một hệ dung môi đơn

hoặc đa thành phần được trộn với nhau theo một tỷ lệ nhất định. Dung môi pha

động chạy bằng cách đặt bản mỏng vào hệ dung môi này theo hướng phần có vết

chấm ở dưới. Dưới tác dụng của lực mao quản, dung môi pha động sẽ chuyển động

qua lớp hấp phụ, các cấu tử sẽ di chuyển theo hướng pha động nhưng với vận tốc
khác nhau đưa đến việc tách các cấu tử ra khỏi nhau, ta thu được một sắc ký đồ trên

lớp mỏng.

Phương pháp sắc ký lớp mỏng được ứng dụng để định tính, thử độ tinh

khiết, cũng có thể để định lượng.

Ưu điểm cơ bản là thiết bị đơn giản, thời gian phân tích nhanh, khá chọn lọc.

3.3.3.2. Đại lượng đặc trưng
- Hệ số lưu giữ: Đại lượng đặc trưng cho mức độ di chuyển của chất

phân tích là hệ số lưu giữ Rf (Retard factor) hay còn gọi là thừa số chậm. Đó là tỷ số
68