Page 306 - Hóa phân tích

Qua nhiều kết quả nghiên cứu thấy rằng, việc chọn theo nguyên tắc 1 có xác

suất thành công nhiều hơn. Còn theo nguyên tắc 2 thì pha tĩnh khó cạnh tranh các

chất phân tích với pha động nên thời gian lưu quá ngắn.

 Tính cân đối của pic sắc ký:

Để đảm bảo cho pic sắc ký nhọn và cân đối, tăng hiệu quả tách cần lưu ý một

số điểm sau đây:

- Cột sắc ký: nên dùng cột bảo vệ (đặt trước cột sắc ký) để loại tạp chất có

mặt trong mẫu hoặc trong pha động. Cần định kỳ rửa cột để loại các chất được hấp

phụ mạnh trên pha tĩnh.

- Pha động: Độ tinh khiết của dung môi pha động tác động mạnh đến chất

lượng pic. Cần dùng dung môi tinh khiết cho sắc ký.

- Để giảm thiểu hiện tượng kéo đuôi tăng tính cân đối của pic người ta

thường thêm vào pha động triethylamin 30 mM khi sắc ký các base amin.
Triethylamin sẽ liên kết với một số vị trí họat động trên bề mặt silica nên ngăn cản

lưu giữ chất phân tích ở các vị trí đó. Nếu sắc ký các hợp chất acid có thể giảm
thiểu kéo đuôi bằng cách thêm amoni acetat 30 mM. Với hỗn hợp chưa rõ thành

phần, thường dùng muối triethylamoni acetat 30 mM, hoặc dimethyloctylamin 10

mM. Đôi khi còn dùng dimethyloctylamoni acetat.

- Thể tích ngoài cột của hệ sắc ký được gọi là thể tích chết: thể tích từ lúc

tiêm mẫu đến lúc phát hiện. thể tích này càng nhỏ, pic sắc ký càng ít bị giãn. Vì vậy

người ta dùng detector, các ống nối nhỏ đến mức có thể để giảm thiểu thể tích

ngoài cột.

 Ứng dụng của sắc ký phân bố:

Như trên đã trình bày, sắc ký phân bố pha liên kết được sử dụng phổ biến

(nhất là sắc ký pha đảo) để phân tích hỗn hợp các chất thuộc nhiều lĩnh vực khác

nhau. Bảng 10.4 minh họa ứng dụng của sắc ký phân bố.

296