Page 24 - Giáo trình môn học thực hành vi sinh

2.2. Nhuộm Ziehl - Neelsen

Điểm Điểm
TT Nội dung
chuẩn đạt

1 Chuẩn bị phương tiện:

- Dụng cụ: lam kính sạch, que cấy, giá nhuộm, giá cắn, bôcan, 1,0

que bông cán kim loại

- Hóa chất: các thuốc nhuộm Ziehl - Neelsen 1,0
- Bệnh phẩm: đờm hoặc các dịch khác như dịch màng não, 0,5

nước tiểu...

2 Tiến hành nhuộm

- Đánh dấu tiêu bản 0,5

- Dùng que cấy lấy bệnh phẩm dàn tiêu bản, dàn rộng và mỏng, 1,0
để khô

o
- Cố định tiêu bản bằng cách nhỏ 1 giọt cồn 90 lên tiêu bản rồi 1,0
đốt cháy cồn hoặc hơ qua ngọn lửa đèn cồn 3-4 lần

- Phủ thuốc nhuộm fucsin Ziehl kín hết bệnh phẩm, dùng que 1,0

bông cồn đốt cháy nhẹ dưới lam kính đến khi trên mặt đồ phiến
bốc hơi thì thôi, đốt như vậy 3 lần. Rửa dưới vòi nước chảy nhẹ

- Tẩy màu với hỗn hợp cồn acid bằng cách nhúng tiêu bản vào 0,5

bình chứa cồn acid, khi nào đưa lên chỉ còn vết đỏ nhạt là được.

Rửa nước.

- Nhuộm xanh methylen 30 giây, rửa nước, để khô soi kính 0,5
hiển vi

3 Nhận định kết quả

- Vi khuẩn lao kháng cồn acid: bắt màu đỏ 2,0

- Các vi khuẩn khác: bắt màu xanh 1,0

24