Page 78 - Giáo trình môn học thực hành vi sinh

2 Nếu bệnh phẩm dịch não tủy không đặc thì ly tâm lấy cặn 0,5

3 Lam tiêu bản nhuộm gram, xanh methylen 2,0

4 Nuôi cấy bệnh phẩm vào môi trường thạch máu và thạch sôcôla 1,0
o
5 Để tủ ấm 10% CO , nhiệt độ 36 C/24 giờ 0,5
2
6 Chọn khuẩn lạc nghi ngờ nhuộm soi hình thể 1,0

7 Cấy sang môi trường sôcôla để xác định tính chất sinh vật hóa học 0,5

8 Xác định tính chất sinh vật hóa học

- Thử men oxydase 0,5

- Thử ONPG 0,5

- Thử lên men đường 0,5

- Làm phản ứng ngưng kết trên phiến kính 0,5
9 Nhận xét kết quả 1,0

1.2.2. Sơ đồ phân lập

1.2.3. Xác định các tính chất

- Oxydase (+): Dùng que cấy lấy khuẩn lạc chấm lên khoanh giấy oxydase đã
nhỏ nước muối sinh lý. Trong vòng 10 giây giấy chuyển sang màu tím đen là oxydase

(+), vẫn giữ nguyên màu cũ là oxydase (-). Có thể làm cách khác: nhỏ lên trên khuẩn

lạc ở môi trường 1 giọt paradiphenyl endiamin hydroclorid. Nếu lạc khuẩn từ không

màu chuyển sang màu tím thẫm là oxydase (+).

- Thử ONPG: Cho vào ống nghiệm 0,5 ml nước muối sinh lý vô khuẩn, hòa
o
khuẩn lạc của cầu khuẩn màng não vào, sau đó cho khoanh giấy ONPG để ở 22-25 C,
nếu sau vài phút khoanh giấy chuyển màu vàng là phản ứng (+). Nếu sau vài ngày vẫn

giữ nguyên màu là phản ứng (-), cầu khuẩn màng não ONPG (-).

- Xác định tính chất lên men đường: glucose (+), lactose (-), saccharose (-),

maltose (+).
+ Dùng môi trường MH (Mueller Hinton) + đường + chỉ thị màu xanh

bromothymlol: cho vào 5 ống nghiệm mỗi ống chứa 14 ml môi trường MH đã đun

chảy, cho thêm vào mỗi ống 0,5 ml đường 30% mỗi loại: glucose, maltose, lactose,

saccharose, fructose. Rồi cho vào mỗi ống 0,14 ml dung dịch xanh bromothymol, sau

đó đổ ra đĩa.

78