Page 71 - Giáo trình môn học thực hành vi sinh

- Lên men đường mannit: nuôi cấy tụ cầu vào môi trường schapman, sau 24-48

giờ tụ cầu gây bệnh sẽ làm cho màu của môi trường chuyển từ màu hồng cánh sen

sang màu vàng.

- Phản ứng đông huyết tương.
+ Tiến hành trên lam kính (xác định men coagulase liên kết).

. Hòa đều vi khuẩn vào một giọt nước muối sinh lý trên lam kính.

. Nhỏ tiếp một giọt huyết tương thỏ, lắc đều.

. Kết quả: trong vòng 5 giây, nếu thấy vi khuẩn tụ lại thành các hạt nhỏ là

coagulase liên kết dương tính. Nếu không có hiện tượng gì là âm tính.
+ Tiến hành trên ống nghiệm (xác định coagulase tự do).

. Cho vào 3 ống nghiệm nhỏ, mỗi ống 0,5 ml huyết tương thỏ đã pha loãng 1/4 -

1/2 trong nước muối sinh lý.

. Dùng que lấy vi khuẩn tụ cầu mẫu có coagulase (+) vào ống 1, ống 2 để

nguyên, ống 3 cấy tụ cầu cần xác định.
o
. Để tủ ấm 37 C, đọc kết quả sau 6 giờ.
. Kết quả: ống 1 huyết tương đông lạnh không đổ ra khỏi ống được.

ống 2 huyết tương không đông.

ống 3 huyết tương đông là coagulase (+); không đông là coagulase (-).

Nếu kết quả đọc quá muộn thì có thể trở thành âm tính giả, vì nhiều tụ cầu tiết
men fibrrinolysin làm hỏng huyết tương trước đó đã đông.

2. Chẩn đoán liên cầu khuẩn

2.1. Chuẩn bị phƣơng tiện
- Dụng cụ:

+ Lam kính, ống nghiệm.

+ Bơm kim tiêm, tăm bông vô khuẩn, kim chích.
+ Các dụng cụ nhuộm gram.

- Hóa chất:

+ Nước muối sinh lý.

+ Các thuốc nhuộm gram.

+ Khoanh giấy tẩm etyl hydrocuprein để làm thử nghiệm optochin.
+ Khoanh giấy tẩm bacitracin.

71