Page 97 - Giáo trình môn học thực hành vi sinh
P. 97
6 Từ môi trường canh thang, làm các phản ứng sinh vật hóa học 1,0
xác định trực khuẩn dịch hạch
7 Xác định vi khuẩn bằng phage 1,0
8 Tiêm truyền canh khuẩn cho chuột lang 1,0
9 Đọc kết quả, kết luận 1,0
3. Kỹ thuật nhuộm wayson
3.1. Thuốc nhuộm
- Xanh methylen: 0,75 g
- Fucsin kiềm: 0,2 g
- Cồn methanol: 20 ml
- Phenol 5%: 200 ml
Hòa tan, sau 24 giờ đem đun nóng rồi lọc qua giấy lọc.
3.2. Cách nhuộm
- Dàn tiêu bản, cố định.
- Phủ thuốc nhuộm 20-30 giây, rửa nước.
- Để khô, soi kính hiển vi.
4. Xác định bằng phage
Láng 2 ml canh khuẩn dịch hạch đã nuôi cấy trên môi trường Hottinger ở nhiệt
o
o
độ 28 C. Hút hết canh khuẩn thừa, để môi trường vào tủ ấm 37 C trong 10 phút cho
o
khô mặt thạch. Nhỏ lên mặt thạch 1 giọt phage, để tủ ấm 28 C. Sau 24 giờ thấy 1 vùng
vô khuẩn ở nơi đã nhỏ phage thì đúng là vi khuẩn dịch hạch.
97