Page 97 - Giáo trình môn học thực hành vi sinh
P. 97

6    Từ môi trường canh thang, làm các phản ứng sinh vật hóa học            1,0

                     xác định trực khuẩn dịch hạch

                7    Xác định vi khuẩn bằng phage                                           1,0

                8    Tiêm truyền canh khuẩn cho chuột lang                                  1,0
                9    Đọc kết quả, kết luận                                                  1,0



               3. Kỹ thuật nhuộm wayson

               3.1. Thuốc nhuộm
                     - Xanh methylen:           0,75 g

                     - Fucsin kiềm:             0,2 g

                     - Cồn methanol:            20 ml

                     - Phenol 5%:               200 ml
                     Hòa tan, sau 24 giờ đem đun nóng rồi lọc qua giấy lọc.

               3.2. Cách nhuộm

                     - Dàn tiêu bản, cố định.
                     - Phủ thuốc nhuộm 20-30 giây, rửa nước.

                     - Để khô, soi kính hiển vi.

               4. Xác định bằng phage
                     Láng 2 ml canh khuẩn dịch hạch đã nuôi cấy trên môi trường Hottinger ở nhiệt

                                                                                   o
                     o
               độ 28 C. Hút hết canh khuẩn thừa, để môi trường vào tủ ấm 37 C trong 10 phút cho
                                                                              o
               khô mặt thạch. Nhỏ lên mặt thạch 1 giọt phage, để tủ ấm 28 C. Sau 24 giờ thấy 1 vùng
               vô khuẩn ở nơi đã nhỏ phage thì đúng là vi khuẩn dịch hạch.





























                                                              97
   92   93   94   95   96   97   98   99   100   101   102